索氏提取法操作步驟和注意事項

索氏提取法操作步驟和注意事項
一、原理
利用溶劑回流和虹吸原理，使固體物質(zhì)每一次都能為純的溶劑所萃取，所以萃取效率較高。萃取前應(yīng)先將固體物質(zhì)研磨細，以增加液體浸溶的面積。然后將固體物質(zhì)放在濾紙?zhí)變?nèi)，放置于萃取室中。如圖安裝儀器。當溶劑加熱沸騰后，蒸汽通過導氣管上升，被冷凝為液體滴入提取器中。當液面超過虹吸管*高處時，即發(fā)生虹吸現(xiàn)象，溶液回流入燒瓶，因此可萃取出溶于溶劑的部分物質(zhì)。就這樣利用溶劑回流和虹吸作用，使固體中的可溶物富集到燒瓶內(nèi)。
二、旌派儀器
索氏提取器，干燥器(直徑15～18cm，盛變色硅膠)，不銹鋼鑷子（長20cm） ，培養(yǎng)皿，分析天平（感量0.001g），稱量瓶，恒溫水浴，烘箱，樣品篩（60目）。
三、操作步驟
1、切片
將濾紙切成8cm×8cm，疊成一邊不封口的紙包，用硬鉛筆編寫順序號，按順序排列在培養(yǎng)皿中。將盛有濾紙包的培養(yǎng)皿移入105±2℃烘箱中干燥2h，取出放入干燥器中，冷卻至室溫。按順序?qū)⒏鳛V紙包放人同一稱量瓶中稱重（記作a）、稱量時室內(nèi)相對濕度必須低于70%。 　　
2、包裝和干燥
旌派在上述已稱重的濾紙包中裝入3g左右研細的樣品，封好包口，放入105±2℃的烘箱中干燥3h，移至干燥器中冷卻至室溫。按順序號依次放入稱量瓶中稱重（記作b）。
3、抽提
將裝有樣品的濾紙包用長鑷子放入抽提筒中，注入一次虹吸量的1.67倍的無水乙醚，使樣品包完全浸沒在乙醚中。連接好抽提器各部分，接通冷凝水水流，在恒溫水浴中進行抽提，調(diào)節(jié)水溫在70～80℃之間，使冷凝下滴的乙醚成連珠狀（120～150滴/min或回流7次/h以上），抽提至抽取筒內(nèi)的乙醚用濾紙點滴檢查無油跡為止（約需6～12h）。抽提完畢后，用長鑷子取出濾紙包，在通風處使乙醚揮發(fā)（抽提室溫以12～25℃為宜）。提取瓶中的乙醚另行回收。
4、稱重
待乙醚揮發(fā)之后，將濾紙包置于105±2℃烘箱中干燥2h，放入干燥器冷卻至恒重為止（記作c）。
四、結(jié)果與計算
粗脂肪含量（%）=（ b－c）/（b－a） ×100
式中：a：稱量瓶加濾紙包重（g）
b：稱量瓶加濾紙包和烘干樣重（g）
c：稱量瓶加濾紙包和抽提后烘干殘渣重（g）
五、注意事項
1．測定用樣品、抽提器、抽提用有機溶劑都需要進行脫水處理。
抽提體系中有水，會使樣品中的水溶性物質(zhì)溶出，導致測定結(jié)果偏高；抽提體系中有水，則抽提溶劑易被水飽和（尤其是乙醚，可飽和約2%的水），從而影響抽提效率；樣品中有水，抽提溶劑不易滲入細胞組織內(nèi)部，結(jié)果不易將脂肪抽提干凈。
2.試樣粗細度要適宜。
試樣粉末過粗，脂肪不易抽提干凈；試樣粉末過細，則有可能透過濾紙孔隙隨回流溶劑流失，影響測定結(jié)果。
3.索氏抽提法測定脂肪*大的不足是耗時過長。
如能將樣品先回流1～2次，然后浸泡在溶劑中過夜，次日再繼續(xù)抽提，則可明顯縮短抽提時間。
4.必須十分注意乙醚的安全使用。
抽提室內(nèi)嚴禁有明火存在或用明火加熱。乙醚中不得含有過氧化物，保持抽提室內(nèi)良好通風，以防燃爆。乙醚中過氧化物的檢查方法是：取適量乙醚，加入碘化鉀溶液，用力搖動，放置1min，若出現(xiàn)黃色則表明存在過氧化物，應(yīng)進行處理后方可使用。處理的方法是：將乙醚放入分液漏斗，先以1/5乙醚量的稀KOH溶液洗滌2～3次，以除去乙醇；然后用鹽酸酸化，加入1/5乙醚量的FeSO4或Na2SO3溶液，振搖，靜置，分層后棄去下層水溶液，以除去過氧化物；*后用水洗至中性，用無水CaCl2或無水Na2SO4脫水，并進行重蒸餾。